Resultado da pesquisa (10)
Termo utilizado na pesquisa fatores de virulência
#1 - Stx1 and Stx2 subtyping and antimicrobial resistance in Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) isolates from cattle and sheep feces in the Southeastern region of the State of Goiás, Brazil
Abstract in English:
imicrobial resistance in 106 Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) strains isolated from cattle and sheep feces. PCR was used to determine the subtypes, and the disk-diffusion method was used to evaluate the antimicrobial resistance. Ten antibiotics from five different classes were tested. Among the isolates of bovine origin, two subtypes of Stx1 (Stx1a and Stx1c), and four subtypes of Stx2 (Stx2a, Stx2b, Stx2c, and Stx2d) were identified. In isolates of sheep origin, two subtypes of Stx1 (Stx1a and Stx1c), and four subtypes of Stx2 (Stx2a, Stx2b, Stx2c, and Stx2 g) were identified. The results obtained suggest the presence of high diversity in Stx1 and Stx2 genes. Further, 96.6% (57/59) of bovine fecal strains and 89.4% (42/47) of sheep fecal strains showed resistance to at least one tested antibiotic. In both animal species, most strains were multidrug-resistant (MDR) (67.8% in cattle and 59.6% in sheep), with no significant difference between host animals. Adult animals were eight times more likely to have STEC with greater pathogenic potential. STEC with the highest pathogenic potential were three times more likely to be multidrug-resistant than STEC with the lowest pathogenic potential. The data reported in this study suggests the occurrence of strains with high potential pathogenicity in the region studied. Therefore, the ruminants of this region are carriers of strains that can cause infections in humans.
Abstract in Portuguese:
O presente estudo teve como objetivo subtipar os genes Stx1 e Stx2 e caracterizar a resistência antimicrobiana em 106 isolados de Escherichia coli produtoras de toxinas Shiga (STEC) isoladas de fezes de bovinos e ovinos. A PCR foi utilizada para determinar os subtipos e o método de difusão em disco foi utilizado para avaliar a resistência antimicrobiana. Dez antibióticos de cinco classes diferentes foram testados. Entre os isolados de origem bovina, foram identificados dois subtipos de Stx1 (Stx1a e Stx1c) e quatro subtipos de Stx2 (Stx2a, Stx2b, Stx2c e Stx2d). Nos isolados de origem ovina, foram identificados dois subtipos de Stx1 (Stx1a e Stx1c) e quatro subtipos de Stx2 (Stx2a, Stx2b, Stx2c e Stx2g). Os resultados obtidos sugerem a presença de alta variabilidade nos genes Stx1 e Stx2. Além disso, 96,6% (57/59) dos isolados fecais de bovinos e 89,4% (42/47) dos isolados de ovinos mostraram resistência a pelo menos um antibiótico testado. Em ambas as espécies animais, a maioria das cepas foi multirresistente (MDR) (67,8% em bovinos e 59,6% em ovinos), sem diferença significativa entre as espécies animais do reservatório. Os animais adultos tiveram oito vezes mais chances de apresentar STEC com maior potencial patogênico. STEC com o maior potencial patogênico teve três vezes mais chances de ser multirresistente do que o STEC com o menor potencial patogênico. Os dados relatados neste estudo sugerem a ocorrência de cepas com alto potencial de patogenicidade na região estudada. Portanto, os ruminantes dessa região são hospedeiros de isolados que podem causar infecções em humanos.
#2 - Frequency of Staphylococcus aureus virulence genes in milk of cows and goats with mastitis
Abstract in English:
The present study determined the frequency of Staphylococcus aureus virulence genes in 2,253 milk samples of cows (n=1000) and goats (n=1253) raised in three different geographical regions of the state Pernambuco, Brazil. The presence of genes of virulence factors associated to adhesion to host cells (fnbA, fnbB, clfA and clfB), toxinosis (sea, seb, sec, sed, seg, seh, sei, tsst, hla and hlb), and capsular polysaccharide (cap5 and cap8) was evaluated by PCR. A total of 123 and 27 S. aureus strains were isolated from cows’ and goats’ milk, respectively. The sec and tsst genes were detected exclusively in goats’ isolates, while the seh gene was only identified in cows’ isolates. The number of toxin genes per strain showed that goats’ isolates are likely more toxic than bovines’ isolates. The cap5 genotype predominated in both host species, especially in strains collected from cows raised in the Agreste region. The cap8 genotype is likely more virulent due to the number of virulence genes per strain. The results of the present study demonstrate that S. aureus may pose a potential threat to human health in Brazil, and, therefore, these results should support actions related to mastitis control programs.
Abstract in Portuguese:
O presente estudo determinou a frequência de genes de virulência de Staphylococcus aureus em 2253 amostras de leite, sendo de vacas n=1000 e de cabras n=1253, procedentes das três regiões geográficas do estado de Pernambuco, Brasil. A presença de genes de fatores de virulência associados à adesão às células hospedeiras (fnbA, fnbB, clfA e clfB), toxinosis (sea, seb, sec, sed, seg, seh, sei, tsst, hla e hlb) e polissacarídeo capsular (cap5 e cap8) foram avaliadas por PCR. Um total de 123 e 27 cepas de S. aureus foram isoladas do leite de vacas e cabras, respectivamente. Os genes sec e tsst foram detectados exclusivamente em isolados de cabras, enquanto o gene seh foi identificado apenas em isolados de vaca. O número de genes de toxina por cepa mostrou que os isolados de cabras são potencialmente mais tóxicos do que os isolados obtidos de bovinos. O genótipo cap5 predominou em ambas as espécies hospedeiras, especialmente em cepas coletadas de vacas criadas na região Agreste. O genótipo cap8 é potencialmente mais virulento devido ao número de genes de virulência por isolado. Os resultados do presente estudo demonstram que S. aureus pode representar uma ameaça potencial para a saúde humana no Brasil e, portanto, estes resultados devem subsidiar ações relacionadas aos programas de controle de mastite.
#3 - Relationship between virulence factor genes in coagulase-negative Staphylococcus spp. and failure of antimicrobial treatment of subclinical mastitis in sheep
Abstract in English:
Coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) are the main microorganisms involved in ovine mastitis. Treatment at the end of lactation can contribute towards cure and prevention of subclinical cases during the subsequent lactation. However, virulence factors and resistance mechanisms presented by CNS can decrease cure rates. The aims of the study were to identify the species of CNS in milk of mastitic ewes with and without antimicrobial treatment, and to investigate the presence of genes relating to resistance of β-lactam antimicrobials, formation of biofilms, production of enterotoxins and production of the toxic shock syndrome toxin. Cases of failure in the treatment were related with the presence/absence of the respective genes. Sixty sheep were divided into three groups: G1, without treatment; G2, animals treated via the intramammary route with 100mg of cloxacillin during drying off; and G3, sheep treated via the intramammary route with 50 mg of nanoparticulate cloxacillin. Milk samples were gathered during drying off and 15 and 30 days after the parturition of the subsequent lactation. The analyses to identify the species of CNS were carried out by means of the internal transcribe spacer technique and the investigation of the genes responsible for the virulence factors and resistance to oxacillin was performed using the polymerase chain reaction (PCR) technique. No sample was positive for the mecA gene. The only gene relating to production of enterotoxins was sec. Among the genes relating to production of biofilm, icaD was the only one identified in the three experimental groups. Staphylococcus warneri was the main species of CNS isolated during the pre and post-partum periods of the sheep. The species carrying genes relating to production of enterotoxins and biofilms were present in uncured sheep.
Abstract in Portuguese:
Staphylococus spp. coagulase-negativos (SCN) estão entre os principais micro-organismos envolvidos na mastite ovina. O tratamento ao final da lactação pode contribuir com a cura e a prevenção de casos subclínicos durante a lactação seguinte. Todavia, fatores de virulência e mecanismos de resistência apresentados por SCN podem reduzir as taxas de cura. Os objetivos desse estudo foram identificar as espécies de SCN no leite de ovelhas com mastite com e sem tratamento antimicrobiano e investigar a presença de genes relacionados com resistência a antibióticos beta lactâmicos, formação de biofilmes, produção de enterotoxinas e produção da toxina da síndrome do choque tóxico. Casos de falhas no tratamento foram relacionados com a presença/ausência dos respectivos genes. Sessenta ovelhas foram divididas em três grupos: G1, sem tratamento; G2, animais tratados via intramamária com 100mg de cloxacilina antes da secagem; e G3, ovelhas tratadas via intramamária com 50 mg de cloxacilina nanoparticulada. Amostras de leite foram obtidas durante a secagem e 15 e 30 dias depois do parto na lactação seguinte. As análises para identificar as espécies de SCN foram conduzidas por meio da técnica de Internal transcribe spacer e a investigação dos genes responsáveis pelos fatores de virulência e resistência à oxacilina foi realizada usando a técnica reação em cadeia da polimerase. Nenhuma amostra foi positiva para o gene mecA. O único gene relacionado com a produção de enterotoxinas foi o sec. Dentre os genes relacionados com a produção de biofilme, icaD foi o único identificado nos três grupos experimentais. Staphylococcus warneri foi a principal espécie de SCN isolada durante o pré e pós-parto. As espécies que apresentaram genes relacionados com a produção de enterotoxinas e biofilmes estavam presentes nas ovelhas não curadas.
#4 - Detection of virulence factors and antimicrobial resistance patterns in Shiga toxin-producing Escherichia coli isolates from sheep, 35(9):775-780
Abstract in English:
ABSTRACT.- Ferreira M.R.A., Silva T.S., Stella A.E., Conceição F.R., Reis E.F. & Moreira C.N. 2015. Detection of virulence factors and antimicrobial resistance patterns in Shiga toxin-producing Escherichia coli isolates from sheep. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(9):775-780. Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Goiás, Regional Jataí, Rodovia BR-364 Km 192 nº3.800, Parque Industrial, Cx. Postal 3, Jataí GO 75801-615, Brazil. E-mail: cissanm@yahoo.com.br
In order to detect virulence factors in Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) isolates and investigate the antimicrobial resistance profile, rectal swabs were collected from healthy sheep of the races Santa Inês and Dorper. Of the 115 E. coli isolates obtained, 78.3% (90/115) were characterized as STEC, of which 52.2% (47/90) carried stx1 gene, 33.3% (30/90) stx2 and 14.5% (13/90) both genes. In search of virulence factors, 47.7% and 32.2% of the isolates carried the genes saa and cnf1. According to the analysis of the antimicrobial resistance profile, 83.3% (75/90) were resistant to at least one of the antibiotics tested. In phylogenetic classification grouped 24.4% (22/90) in group D (pathogenic), 32.2% (29/90) in group B1 (commensal) and 43.3% (39/90) in group A (commensal). The presence of several virulence factors as well as the high number of multiresistant isolates found in this study support the statement that sheep are potential carriers of pathogens threatening public health.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Ferreira M.R.A., Silva T.S., Stella A.E., Conceição F.R., Reis E.F. & Moreira C.N. 2015. Detection of virulence factors and antimicrobial resistance patterns in Shiga toxin-producing Escherichia coli isolates from sheep. [Detecção de fatores de virulência e de resistência antimicrobiana em isolados produtores de toxina Shiga de ovinos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 35(9):775-780. Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Goiás, Regional Jataí, Rodovia BR-364 Km 192 nº3.800, Parque Industrial, Cx. Postal 3, Jataí GO 75801-615, Brazil. E-mail: cissanm@yahoo.com.br
A fim de detectar os fatores de virulência em isolados de E. coli produtoras de toxina Shiga (STEC) e investigar o perfil de resistência aos antimicrobianos, swabs retais foram coletados em ovelhas saudáveis das raças Santa Inês e Dorper. Dos 115 isolados de E. coli obtidos, 78,3% (90/115) foram caracterizados como STEC, dos quais 52,2% (47/90) possuíam o gene stx1, 33,3% (30/90) stx2 e 14,5% (13/90) ambos os genes. Em busca de fatores de virulência, 47,7% e 32,2% dos isolados apresentaram genes saa e cnf1. De acordo com a análise do perfil de resistência a antimicrobianos, 83,3% (75/90) eram resistentes a pelo menos um dos antibióticos testados. Na classificação filogenética, os isolados foram agrupados 24,4% (22/90) no grupo D (patogênico), 32,2% (29/90) no grupo B1 (comensal) e 43,3% (39/90) no grupo A (comensal). A presença de vários fatores de virulência, bem como o elevado número de isolados multirresistentes encontrados neste estudo apoia a afirmação de que as ovelhas são portadoras potenciais de patógenos que ameaçam a saúde pública.
#5 - Detection of virulence factors in Escherichia coli and analysis of Salmonella spp. in psittacines, 33(2):241-246
Abstract in English:
ABSTRACT.- Corrêa I.M.O, Flores F., Schneiders G.H., Pereira L.Q., Brito B.G. & Lovato M. 2013. [Detection of virulence factors in Escherichia coli and analysis of Salmonella spp. in psittacines.] Detecção de fatores de virulência de Escherichia coli e análise de Salmonella spp. em psitacídeos. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(2):241-246. Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria, Av. Roraima 1000, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: maristelalovato@gmail.com
The enteric flora of psittacines is mainly composed of Gram positive bacteria. Gram negative bacteria, like Escherichia coli and Salmonella spp., have a high pathogenic potential and can be considerate as an indicative of management problems that may culminate in disease manifestation due to stress factors, poor diets and overcrowding, in combination with a high bacterial load on the environment. The objective of this study was evaluated the presence of Salmonella spp., Escherichia coli and the virulence genes iss and iutA from E. coli isolates. Forty-four samples were analyzed from psittacines living in captivity, which fifteen samples were from organs fragments of necropsied birds, and twenty-nine were from cloacal and crop swabs of red-spectacled parrots (Amazona pretrei) keeping in captivity. No samples were positive for Salmonella spp. In the samples in which E. coli was detected, both virulence factors (genes iss and iutA) were present.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Corrêa I.M.O, Flores F., Schneiders G.H., Pereira L.Q., Brito B.G. & Lovato M. 2013. [Detection of virulence factors in Escherichia coli and analysis of Salmonella spp. in psittacines.] Detecção de fatores de virulência de Escherichia coli e análise de Salmonella spp. em psitacídeos. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(2):241-246. Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria, Av. Roraima 1000, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: maristelalovato@gmail.com
A flora entérica dos psitacídeos é composta principalmente por bactérias Gram positivas. Bactérias Gram negativas, como Escherichia coli e Salmonella spp., apresentam elevado potencial patogênico, sendo consideradas indicativo de problemas de manejo, que poderão culminar em manifestação de doenças em decorrência de fatores estressantes, dietas deficientes e superlotação, combinados com alta carga bacteriana no ambiente. O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença de Salmonella spp., Escherichia coli e os fatores de virulência dos genes iss e iutA dos isolados de E. coli. Analisou-se um total de 44 amostras provenientes de psitacídeos criados em cativeiro, sendo estas 15 fragmentos de órgãos de aves submetidas a exame de necropsia e também 29 amostras de swabs de cloaca e inglúvio de papagaios-charão (Amazona pretrei) criados em cativeiro. Nenhuma amostra foi positiva para Salmonella spp. Nas amostras de E. coli detectou-se ambos os fatores de virulência pesquisados.
#6 - Molecular characterization of virulence factors in Aeromonas hydrophila obtained from fish, 32(8):701-706
Abstract in English:
ABSTRACT.- Oliveira S.T.L., Veneroni-Gouveia G. & Costa M.M. 2012. Molecular characterization of virulence factors in Aeromonas hydrophila obtained from fish. Pesquisa Veterinária Brasileira 32(8):701-706. Laboratório de Microbiologia e Imunologia Animal, Universidade Federal do Vale do São Francisco, Campus Ciências Agrárias, Colegiado Acadêmico de Zootecnia, Rodovia BR 407 Km 12, Lote 543, Projeto de Irrigação Nilo Coelho s/n, C1, Petrolina, PE 56300-000, Brazil. E-mail: mateus.costa@univasf.edu.br
Multiple factors can be involved in the virulence processes of Aeromonas hydrophila. The objective of the present paper was to verify the presence of aerolysin, hidrolipase, elastase and lipase virulence genes through the polymerase chain reaction (PCR) in A. hydrophila isolates obtained from fish of the São Francisco River Valley, and to evaluate virulence according to the presence of these genes in Nile tilapia fingerlings. One hundred and fourteen isolates from the bacteria were used. DNA was heat extracted and PCR undertaken using specific primers described in the literature. For in vivo tests Nile tilapia fingerlings were used. From the PCR tests, negative isolates for all genes tested were selected, positive isolates for two genes (aerolysin and elastase) and positive for the four genes tested. These were inoculated at a concentration of 108 UFC/ml into the tilapias, considered as treatments; another group of animals was used as control (with inoculation of saline solution). In all, 12 distinct standards regarding the presence of virulence factors in isolates from A. hydrophila, were observed. Of the 114 isolates analyzed, 100 (87.72%) presented at least one of the virulence factors under study. The virulence factors were widely distributed among the A. hydrophila isolates. Aerolysin was the most frequent virulence factor present in the isolates analyzed. A. hydrophila led to the mortality of the Nile tilapia fingerlings, regardless of the absence or quantity of virulence genes tested.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Oliveira S.T.L., Veneroni-Gouveia G. & Costa M.M. 2012. Molecular characterization of virulence factors in Aeromonas hydrophila obtained from fish. Pesquisa Veterinária Brasileira 32(8):701-706. Laboratório de Microbiologia e Imunologia Animal, Universidade Federal do Vale do São Francisco, Campus Ciências Agrárias, Colegiado Acadêmico de Zootecnia, Rodovia BR 407 Km 12, Lote 543, Projeto de Irrigação Nilo Coelho s/n, C1, Petrolina, PE 56300-000, Brazil. E-mail: mateus.costa@univasf.edu.br
Múltiplos fatores podem estar envolvidos nos processos de virulência de Aeromonas hydrophila. O objetivo do presente trabalho foi verificar a presença dos genes de virulência aerolisina, hidrolipase, elastase e lipase, utilizando a reação em cadeia da polimerase (PCR), em isolados de Aeromonas hydrophila obtidos de peixes do Vale do São Francisco e, avaliar sua virulência de acordo com a presença desses genes de virulência em alevinos de tilápia do Nilo. Cento e quatorze isolados foram utilizados. O DNA foi termoextraído e a PCR realizada com a utilização de inciadores específicos descritos pela literatura. Para os testes in vivo alevinos de tilápia do Nilo foram utilizados. Segundo os resultados da PCR, foram selecionados isolados negativos para todos os genes de virulência testados, isolados positivos para dois genes de virulência, (aerolisina e elastase) e positivos para os quatro genes avaliados. Esses isolados foram inoculados na concentração de 108 UFC/ml nos alevinos e foram considerados como tratamentos e, um outro grupo de animais foi utilizado como grupo controle (com inoculação de solução salina). Ao final, 12 padrões distintos, em relação a presença dos fatores de virulência nos isolados de A. Hydrophila, foram observados. Dentre os 114 isolados analisados, 100 (87,72%) apresentaram pelo menos um dos genes de virulência sob estudo. Os fatores de virulência foram amplamente distribuídos entre os isolados de A. hydrophila. A aerolisina foi o fator de virulência mais frequente nos isolados analisados. A. hydrophila levou à mortalidade dos alevinos de tilápia do Nilo, independente da ausência ou quantidade de genes de virulência testados.
#7 - Virulence factors and antimicrobial resistance in Staphylo-coccus aureus isolated from bovine mastitis in Rio de Janeiro, p.369-374
Abstract in English:
ABSTRACT.- Coelho S.M.O., Reinoso E., Pereira I.A., Soares L.C., Demo M., Bogni C & Souza M.M.S. 2009. Virulence factors and antimicrobial resistance in Staphylo-coccus aureus isolated from bovine mastitis in Rio de Janeiro. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(5):369-374. Departamento de Microbiologia e Imunologia Veterinária, Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. E-mail: miliane@ufrrj.br
The study was conducted to characterize pheno-genotypically the virulence factors and resistance pattern of Staphylococcus aureus isolates from milk samples of cows with subclinical mastitis. All hemolytic isolates presented beta-hemolysin, and 38% of the non-hemolytic isolates were able to express hemolysins in the presence of a beta-hemolytic strain. The amplification of the coa-gene displayed four different size polymorphisms with about 400 bp, 600 bp, 700 bp and 900 bp. The spaA gene that encodes the IgG-binding region of protein A revealed sizes of 700 bp and 900 bp. The amplification of region X from spaA yielded a single amplicon for each isolate with the prevalent amplicon size being of 180 bp. Amplification of sae gene yielded an amplicon size of 920 bp in 71% of the isolates. Antibiotic resistance pattern revealed that 42% S. aureus were susceptible to all antimicrobials tested. Seven different antibiotic patterns were observed. Our results indicated that 47% and 25% of S. aureus strains exhibited resistance to penicillin and oxacillin respectively. All oxacillin-resistant isolates were mecA-positive.
Abstract in Portuguese:
ABSTRACT.- Coelho S.M.O., Reinoso E., Pereira I.A., Soares L.C., Demo M., Bogni C & Souza M.M.S. 2009. Virulence factors and antimicrobial resistance in Staphylo-coccus aureus isolated from bovine mastitis in Rio de Janeiro. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(5):369-374. Departamento de Microbiologia e Imunologia Veterinária, Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. E-mail: miliane@ufrrj.br
The study was conducted to characterize pheno-genotypically the virulence factors and resistance pattern of Staphylococcus aureus isolates from milk samples of cows with subclinical mastitis. All hemolytic isolates presented beta-hemolysin, and 38% of the non-hemolytic isolates were able to express hemolysins in the presence of a beta-hemolytic strain. The amplification of the coa-gene displayed four different size polymorphisms with about 400 bp, 600 bp, 700 bp and 900 bp. The spaA gene that encodes the IgG-binding region of protein A revealed sizes of 700 bp and 900 bp. The amplification of region X from spaA yielded a single amplicon for each isolate with the prevalent amplicon size being of 180 bp. Amplification of sae gene yielded an amplicon size of 920 bp in 71% of the isolates. Antibiotic resistance pattern revealed that 42% S. aureus were susceptible to all antimicrobials tested. Seven different antibiotic patterns were observed. Our results indicated that 47% and 25% of S. aureus strains exhibited resistance to penicillin and oxacillin respectively. All oxacillin-resistant isolates were mecA-positive.
#8 - Virulence factors of Yersinia enterocolitica 0:3 isolated from healthy pigs, Rio de Janeiro
Abstract in English:
Virulence factors were determined in 43 cultures of Yersinia enterocolitica serotype 0:3, biotype 4, phagetype VIII, isolated from apparently healthy pigs. Twenty one isolates were from tonsils, twelve from feces, six from colon contents and four from tongues. The in vitro tests consisted of examining autoagglutination at 36ºC, and absorption of Congo Red. The virulence assays of Y. enterocolitica were conducted by in vivo tests, testing the invasiveness into guinea-pig eyes and detection of heat stable enterotoxin in suckling mice. The results revealed a higher positivity percentage of the autoagglutination test (76.7%), followed by absorption of Congo Red (53.5%), invasiveness into guinea-pig eyes (20.9%) and detection of heat-stable enterotoxin (7.0%). A higher correlation was found in vitro test as compareci to in vivo tests, which characterized 53.5% Y. enterocolitica isolates tested as virulent and which allowed the conclusion that the simultaneous utilization of autoagglutination and absorption of Congo Red tests may be relevant for the identification of pathogenic strains.
Abstract in Portuguese:
Foram pesquisados os fatores de virulência em 43 estirpes de Yersinia enterocolitica sorotipo 0:3, biotipo 4, lisotipo VIII isoladas de suínos sadios, sendo 21 amostras provenientes de amigdala, 12 de fezes, seis de conteúdo de cólon e quatro de língua. A avaliação da virulência foi verificada pela invasibilidade em olho de cobaia, detecção de enterotoxina termoestável em camundongo lactente, auto aglutinação a 36 ºC e absorção do vermelho Congo. Os resultados revelaram um maior percentual de positividade no teste de auto-aglutinação (76.7%), seguido da absorção do vermelho Congo (53,9%), invasibilidade em olho de cobaia (20,9%) e detecção de enterotoxina termoestável (7,0%). Evidenciou-se maior correlação entre os testes realizados "in vitro" quando comparados às provas "in vivo", caracterizando 53,5% das amostra testadas, como virulentas. A utilização simultânea dos testes de auto-aglutinação a 36°C e absorção do vermelho Congo na identificação de cepas patogênicas parecem ser importantes.
#9 - Experimental reproduction of colibacillosis in piglets
Abstract in English:
Experimental neonatal colibacillosis, in newbom piglets was attempted using 4 groups of enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) strains, as follows: 1) Two strains from serogroup 0149:K91, both producing thermolabile enterotoxin (LT) and K88 colonization factor; 2) Two strains from serogroup 0101:K30, producing thermostable enterotoxin (STa) and K99 colonization factor; 3) One strain from serogroup 0157:K?, producing thermostable enterotoxin of the STb type and K88 antigen, and 4) One strain from serogroup 08:K?, producing STa enterotoxin anda new colonization factor, named F42. All fourteen piglets inoculated orally with these strains of ETEC developed clinical disease and died up to 42 hours after inoculation, being possible to visualize, by indirect fluorescent antibody technique, in all of them, that colonization of small intestine by the inoculated ETEC had occurred. The production of STa "in vivo", into the gut, by strains from group 2 and 4 was an important factor to prove that experimental colibacillosis did occur. In fact, coprocultures either from the diarrheic stools or from the gut contents revealed a high rate of LT+-K88+ and STa+ -K99+ colonies recovery. Though some quantitative differences among the examined materiais have been observed, the recovery of STa + -F42 + colonies was lower than in the former groups of ETEC strains. However clinical symptoms, production of STa "in vivo" and colonization of the gut of inoculated piglets proved that F42 antigen is undoubtedly a new colonization factor among ETEC involved in porcine colibacillosis.
Abstract in Portuguese:
Foi tentada a reprodução experimental da colibacilose suína neonatal, em leitões recém-nascidos, usando-se para tal 4 grupos de amostras de Escherichia coli enterotoxigênicas (ETEC), a saber: 1) Duas amostras do sorogrupo 0149:K81, produtoras da enterotoxina termolábil (L T) e do fator de colonização K88; 2) Duas amostras do sorogrupo 0101:K30, produtoras da enterotoxina termoestável (STa) e do fator de colonização K99; 3) Uma amostra do sorogrupo 0157:K?, produtora da enterotoxina termoestável do tipo STb e do fator de colonização K88, e 4) Uma amostra do sorogrupo 08:K?, produtora da enterotoxina termoestável (STa) e de um novo fator de colonização, denominado F42. Todos os 14 leitões inoculados por via oral com estas amostras de ETEC desenvolveram doença clínica com morte até 42 horas após a inoculação, tendo sido possível detectar em todos eles a colonização do intestino delgado pelas amostras de ETEC inoculadas, através da técnica de imunofluorescência indireta. A produção de STa "in vivo", por amostras dos grupos 2 e 4 foi um fator importante na comprovação de que a reprodução experimental da doença por estas amostras realmente ocorreu. De fato, a coprocultura, quer das fezes diarréicas, quer do conteúdo intestinal dos animais, revelou um alto índice de recuperação de colonias LT+ -K88+ e STa+ -K99+. Embora tenham ocorrido entre os diversos materiais examinados algumas diferenças quantitativas, a recuperação de colônias STa=+ -F42+ foi menor do que nos casos anteriores, porém os achados referentes a doença clínica, produção de STa "in vivo" e colonização do intestino delgado dos leitões inoculados, comprovaram que o antígeno F42 é, sem dúvida, um novo fator de colonização em amostras de ETEC envolvidas na colibacilose suína.
#10 - Virulence factors present in cultures of Escherichia coli isolated from pigs in the region of Concórdia, Santa Catarina, Brazil
Abstract in English:
Four hundred and seventy-seven cultures of Escherichia coli isolated in the region of Concórdia, Santa Catarina, Brazil, were examined for the presence of ''virulence factors", such as: thermolabile (LT) enterotoxin; thermostable (STa and STb) enterotoxins and the colonization factors K88, K99 and 987P. Paired samples of sera from some sick piglets· were also collected for the search of anti-LT antibodies. Eighty-six (18,02%) E. coli cultures produced ·STa enterotoxin whereas LT enterotoxin was detected in 8 (1,67%) only. Among 391 STa- cultures 49 (12,53%) were STb+. Among 28 K88+ cultures, 1 produced LT; 9 STa and the remaining were non-enterotoxigenic. None of the L T+ cultures codified for K99 antigen, which, on the other hand, was found in 5 STa+ and in 17 non-entérotoxigenic cultures. 987P antigen was found in 3 non-enterotoxigenic cultures. Four out of 10 samples of the examined paired sera showed serological conversion in relation to titres found in ·the passive immunehemolysis (PIH) test. The results of serogrouping revealed that all LT+ cultures belonged to serogroup 01.49. Among 86 STa+ cultures, 1 was grouped as serogroup 09, 2 as 010, 4 as 035; 2 as 064; 3 as 0108; 2 as 0138; 1 as 0149 and 1 as 0157. Seventy STa+ cultures were not classified.· Among 49 STb+ cultures 1 belonged to serogroup 09; 4 to 010; 1 to 035; 1 to 0139; 2 to 0149; 1 to 0157 and 39 cultures could not be serogrouped. These results suggest that in porcine colibacillosis of the region of Concórdia, SC, Brasil the thermostable enterotoxins (STa and STb) may play an important role. It could be possible that among these cultures other colonization factors, different from K88, K99 and 987P may occur. Also, most cultures examined could not be grouped among the serogroups generally accepted as enteropathogenic for swine.
Abstract in Portuguese:
Quatrocentos e setenta e sete amostras de Escherichia coli, isoladas na região de Concórdia, SC, Brazil, foram examinadas quanto a presença de fatores de virulência a saber: enterotoxína termolábil (LT), enterotoxinas termoestáveis (STa e STb) e os fatores de colonização K88, K99 e 987P. Amostras pareadas de soro de alguns leitões doentes foram também coletadas para a pesquisa de anticorpos anti-LT. Oitenta e seis (18,02%) amostras de E. coli produziram a enterotoxina STa enquanto a enterotoxina LT-foi detectada em apenas 8 (1.67%). Entre as-381 amostras STa-, 49 (12.53%) foram STb+. Entre 28 amostras K88+, uma produziu LT, 9 STa e as restantes eram não enterotoxigenicas. Nenhuma das amostras ·LT+ codificou para o antígeno K99, porém, este foi encontrado em 5 amostras STa+ e em 17 não entérotoxigênicas. Quatro entre os 10 soros examinados apresentaram conversão sorológica nos níveis de anticorpos anti-LT quando os soros foram examinados pelo teste da imunohemólise passiva (PIH). Os resultados dos exames sorológicos revelaram que todas as amostras LT+ pertenciam ao sorogrupo 0149. Entre 86 amostras STa+, 1 foi classificada como pertencendo ao sorogrupo 09, 2 ao 010; 4 ao 035; 2 ao 064; 3 ao 0108; 2 ao 0138; 1 ao 0149; 1 ao 0157 e 70 amostras não foram Classificadas. Entre as 49 amostras STb+ 1 pertencia ao sorogrupo 09; 4 ao 010; 1 ao 035; 1 ao 0139; 2 ao 0149; 1 ao 0157 e 39 não foram classificadas. Estes resultados sugerem que na colibacilose suína da região· de Concórdia as enterotoxinas termoestáveis (STa e STb) possam desempenhar um importante papel, existindo a possibilidade de que nelas possam ocorrer outros fatores de colonização que não K88, K99 e 987P. As amostras estudadas também, em sua maioria, não se enquadraram entre· aqueles sorogrupos geralmente aceitos como enteropatogênicos para suínos.
